داء البروسيلات Brucellosis يعد داء البروسيلات مرض حيواني يصيب بالدرجة الأولى الإنسان تحت ظروف معينة، ويصيب مجموعة كبيرة من الحيوانات بدأ من القوارض وحتى وحيد القرن.
تعريف المرض مرض معد مزمن يصيب الحيوانات الثديية والإنسان ويتميز بالتهاب الأعضاء التناسلية والأغشية الجنينية وأجزاء من الحميل ويؤدي إلى حدوث الإجهاض بنسب عالية مع تسمم دموي ومع احتباس بالمشيمة والتهاب بطانية الرحم، وغالبا ما ينتج عنه قلة الخصوبة أوحتى عقم الحيوان. العامل المسبب تنتمي عصيات البروسلية إلى جنس البروسيلة الذي ينتمي إلى مجمعة العصيات والمكورات الهوائية(محبة الهواء القليل سلبية الغرام). وهي عصيات قصيرة أو مكورة طولها(0.6-1.5)ميكرون وعرضها (0.5-0.7)ميكرون سلبية الغرام،غالبا ما تكون مجتمعة أو منفردة بالنسج ،وفي المنابت المغذية تشكل سلاسل قصيرة .وتستطيع التكاثر داخل البلاعم وحيدة النواة للحيوانات غير الملقحة، وهي غير متحركة ولا تشكل أبواغاولا محفظة حقيقية غير صامدة للحمض لكنها تقاوم إزالة اللون بتأثير الحموض الضعيفة مثل حمض الخل 5.0%، ويستفاد من هذه الخاصية في التلوين التميزي للبروسيلة، مثل التلوين بطريقة تسيل_نلسن المعدلة لستامب حيث تبدو البروسيلة حمراء اللون والجراثيم الأخرى زرقاء،وأهم أنواع البروسيلة:1-البروسيلة المالطية:ضارية للأغنام والماعزوتصيب الأبقار والانسان. 2- البروسيلة المجهضة:ضارية للأبقار وعادة تصيب الحيوانات الأخرى والانسان.3-البروسيلة الغنمية:تسبب التهاب البربخ عند الكباش وأحيانااجهاضات الأغنام ولاتصيب الحيوانات الأخرى.4-البروسيلة الخنزيرية:ضارية للخنازير ويمكن أن تصيب الحيوانات الأخرى والانسان.5-البروسيلة الكلبية:ضارية للكلاب وتسبب اجهاضات عند الاناث والتهاب الخصية والبربخ عند الذكور وتنتقل للانسان.6-البروسيلة نيوتومي:ضارية لنوع من الجرذان الصحراوية ولاتصيب الحيوانات الأخرى.
الخواص المزرعية وهي جراثيم هوائية تنمو في الظروف الهوائية العادية عدا البروسيلة المجهضة والغنمية والتي تحتاج عند زرعها الأول إلى جو يحتوي (5-10%)co2 وهي تنمو ببطء بالمنابت المغذية ولا تظهر المستعمرات قبل مضي 48ساعة على الحضن بدرجة37م. تبدو المستعمرات على الآجار المصلي بالدكستروز محدبة مستديرة ملساء قطرها حوالي 0.5ملم ويزداد حجم المستعمرات مع التحضين ويصبح قطرها نحو(1-3)ملم بعد 72 ساعة .وتبدو شفافة عسلية بالضوء النافذ، وزرقاء شاحبة شفافة في الضوء المنعكس. أما مستعمرات البروسيلة على الآجار المد مم تكون أقل حجما0.5_1)ملم بيضاء رمادية لاتحلل الدم. تستخدم منابت عديدة لزرع البروسيلات منها ما يصلح للزرع الأولي للعينات غير الملوثة(طحال خنزير غينيا المحقون بالجراثيم)أو لإعادة زرع المستعمرات النامية مثل الآجار المصلي بالدكستروز الذي يحوي (0.5_1%) مصل حصان ،كما توجد منابت انتقائية لزرع العينات الملوثة مثل :آجار الكستروز المصلي الذي يحتوي فنكوميسين باستيراسين،سيكلوهيكساميد،بوليمكسينB، داء البروسيلة عند الأبقار مرض معد مزمن يصيب الأبقار ويتميز بالتهاب الأعضاء التناسلية والأغشية الجنينية وحدوث الإجهاض عند الإناث الحوامل في المراحل المتقدمة من الحمل بين الشهر (5_7.5) بالإضافة توذم الخصي والبربخ عند الذكور وقلة الإخصاب أو العقم عند كلا الجنسين وتسبب احتباس المشيمة والتهاب الضرع . يصيب الأبقار بغض النظر عن الجنس وبكافة الأعمار حيث تزداد قابلية الإصابة عند الأبقار مع التقدم بالعمر لتبلغ الذروة عند البلوغ الجنسي،حيث تكثر الإصابة بين الأبقارالبكرية التي تحمل لأول مرة وتكثر الإصابة عند الإناث أكثر من الذكور وذلك لأن الجهاز التناسلي يحوي سكر السوربيتول الهام في تكاثر ونمو الجراثيم ويمدها بالطاقة وتعتبر الحيوانات المصابة مصدر العدوى حيث تطرح العامل المسبب مع: 1-عن طريق الأجنة المجهضة والمشائم. 2-السوائل والافرازات الرحمية. 3-والافرازات المهبلية. 4-الحليب. 5-الثيران يمكن أن تطرح العامل المسبب عن طريق السوائل المنوية . 6-العجول الصغيرة يمكن أن تطرحها لفترة محدودة مع البرازدون أن تظهر عليها أعراض سريرية . 7-تعتبر أرض الحظيرة وجدرانها والقش والأعلاف والأدوات الملوثة لها عوامل مساعدة لانتشار المرض. طرق العدوى 1-عن طريق الجهاز الهضمي. 2-عن طريق تلوث ملتحمة العين. 3-عن طريق تلوث جروح وخدوش الجلد. 4-عن طريق الجهاز التنفسي. 5-عن طريق الجهاز التناسلي. 6-عن طريق الكلاب بأن يجلب الحميل المصاب أو يجلب قطعة ناتجةعن بقرة مجهضة ويدخلها للمزرعة 7-عن طريق عامل المزرعة بإدخال بقرة مصابة إلى قطيع سليم. 8-بواسطة الذباب والبعوض. الأعراض 1-ترفع حروري. 2-الإجهاض وغالبا"ما يحدث في المراحل المتقدمة من الحمل مابين الشهر الخامس والثامن. 3-احتقان واحمرار الأغشية المخاطية للمهبل. 4-افرازات مهبلية عديمة الرائحة بيضاء رمادية مخاطية الى مخاطية قيحية وأحيانا دموية . 5-احتباس مشيمة. 6-التهاب في الرحم وخروج سوائل بنية محمرة أورمادية متسخة كريهة الرائحة. 7-عدم إخصاب دائم أو مؤقت عند الأبقار المصابة. 8-التهاب في المفاصل والأوتار وخراجات تحت الجلد والتهاب الضرع. 9-عند حدوث المرض في القطيع لأول مرة تحدث زوبعة من الاجهاضات في الأبقارالحوامل ونادرا"ما تجهض الأبقار مرة ثانية. 10-في الولادة التي تلي الإجهاض الأول يموت المولود أحيانا"أو يولد ضعيفا"أو مشوها". 11-أحيانا"يحدث عرج عندما تتوضع الإصابة في المفاصل. 12-عند الذكور تتركز الإصابة بالخصية والبربخ والأمبولا والغدة المنوية.
الصفة التشريحية 1-التهاب دموي لبطانة الرحم ثم يتحول إلى التهاب قيحي وتجتمع السوائل بين بطانة الرحم والأغشية الجنينية. 2-تضخم الغشاء المخاطي للرحم وتظهر عليه طبقة قيحية تغطي مناطق تنكرز واسعة وخصوصا"في فلقات الرحم مع التهاب قيحي في المشيمة،أما حلقات الرحم فتكون متضخمة ومحتقنة مع ظهور نزف دموي علبها بشكل نقاط وأحزمة نزفية مع تقيح شديد. 3-قبل أيام قليلة من الإجهاض تتضخم الأعضاء التناسلية الخارجية حيث يلاحظ احتقان بطانة المهبل وظهور الأمصال الدموية القيحية أحيانا" مع تضخم الشفران. 4-تضخم الزغابات على الغشاء المشيمي مع حدوث نقاط نزفية مغطاة بطبقة قيحية بنية مصفرة،ويلاحظ أحيانا" نمو نسيجي يؤدي إلى التحامها مع بطانة الرحم مع توضع سوائل قيحية في جوف الرحم. 5-يشتد التهاب في الرحم ويؤدي إلى تليف بطانته الذي يترافق أحيانا"مع تليف قناة فالوب والمبيض الذي يؤدي إلى العقم عند الأبقار. أماالتغيرات التشريحية عند الجنين: 1-توضعات مصلية دموية في منطقة الحبل السري مع تضخمه الشديد واحتوائه على سوائل بيضاء قيحية. 2-تجمع السوائل المصلية الدموية وخيوط الفبرين في الأجواف الداخلية(جوف الصدر –البطن-التامور....الخ) 3-نزف دموي حول عضلة القلب. 4-التهاب في مخاطية الأمعاء والأنفحة بسبب دخول السوائل الجنينية الى جهاز الهضم . 5-تضخم العقد اللمفاوية بسبب التهاب المصلي الدموي فيها. 6-تنكرز بؤري في الكبد بلون أصفر رمادي . 7-التهاب بؤري في الرئة مع احتقان شديد وتوذم. 8-تضخم المفاصل الشديد وتوضع السوائل القيحية فيها. أما عند الذكور: 1-التهاب تنكرزي قيحي في الخصيتين وغشاء الصفن. 2-الخصية المصابة تبدو متضخمة في الحجم وقاسية وتلتصق فها الأغشية الخاصة وتتحول إلى كيس ممتلئ بسوائل قيحية. 3-احتقان وتوذم في القضيب وظهور تقيح تنكرز على سطحه الخارجي. *في بعض الحالات عند الأبقار (ذكور وإناث)يلاحظ التهاب شديد في المفاصل ،حيث يتضم المفصل بشدة و تتوضع في محفظته سوائل مصلية فبرينية أو قيحية تؤدي إلى تآكل الغضاريف ونمو عظمي زائد تسبب عرج شديد. *التهاب شديد في الجملة العصبية المركزية. التشخيص المخبري 1-الفحوص الجرثومية: *الفحص المجري المباشر: تحضر لطخات من فلقات المشيمة ومحتويات معدة الجنين والافرازات الرحمية وصباغتها بصبغة تسيل _نلسن المعدلة لستامب ففي الحالة الايجابية تظهر جراثيم البروسيلة زهرية اللون محمرة مجتمعة داخل الخلايا وخارجها. *عزل البروسيلة من الحليب والافرازات المهبلية: -تأخذ عينات حليب بمقدار 20مل من كل حلمة وتثفل لمدة 10 دقائق بمعدل 3000دورة،/دقيقة ثم يؤخذ الراسب وطبقة الدهن وتزرع على المنابت الجامدة الانتقائية مثل منبت ألبيمي المضاف اليها فنكومسين باستيراسينB،نيستاسين. -أما بالنسبة للسوائل الأخرى والافرازات المهبلية يمكن زرعها مباشرة أو بعد التثفيل ثم تحضن المزارع في جو يحوي 10%co2لمدة عشرة أيام. *حقن حيوانات التجارب مثل خنزير غينيا حيث تثفل عينة حليب 20مل ويحقن قسم من الراسب في حيوانات التجربة ، وبعد 3-6 أسابيع تنفق الحيوانات مع ظهور بؤرتنكرزية على الطحال والكبد والعقد اللمفاوية مع التهاب الخصية عند الذكور بعد الحقن . الاختبارات المصلية أ-اختبار الحلقة بالحليب: يصب في أنبوب 1مل من الحليب المفحوص ثم يضاف اليه 0.03مل من مستضد البروسيلا المجهضة الملونة بالهيماتوكسيلين يمزج بلطف ثم يحضن لمدة ساعة بالدرجة 37م ثم تقرأ النتيجة : النتجة الايجابية :تلون الحلقة الدهنية باللون الأزرق أو اللون الأحمر حسب الكاشف المستخدم ويبقى عمود الحليب أبيض . النتيجة السلبية :يتلون عمود الحليب باللون الأزرق أو الأحمر وتبقى الطبقة الدهنية بيضاء اللون. ب-اختبار روز البنغال:المستضد المستخدم :عبارة عن معلق من خلايا البروسيلة المجهضة في دارئة حامضية ph=3.65ملونة بروز البنغال .يحضر مصل من الحيوان المصاب بتثفيل عينة دم ويؤخذ0.3مل من مصل الحيوان المختبر ويوضع على صفيحة التراص 0.3مل من مستضد روز البنغال الى جانب قطرة المصل،تمزج قطرتي المصل و المستضد وتحرك الصفيحة لمدة أربع دقائق وتقرأ النتيجة: -يعد المصل ايجابي عند حدوث تراص واضح. -يعد المصل سلبي عند عدم حصول تراص. ج-اختبار التراص في الأنابيب: تمدد عينة المصل المختبر في أنابيب بالمحلول الملحي الفينولي بحيث يحوي كل أنبوب 0.5مل من التخفيفات (1/5-1/10......320/1000)يضاف 0.5مل من المستضد في كل أنبوب وتمزج تصبح التراكيز 1/10،1/20،.....660/10000) تضن لمدة 2ساعة بدرجة 37م ثم تفحص الأنابيب ويحدد معيار التراص النهائي وهو أعلى تخفيف للمصل حدث فيه تراص وتحول النتيجة إلى وحدات دولية . وتعد النتيجة ايجابية بالأبقاراذا كان معيار التراص النهائي 100وحدة دولية/مل . د-اختبار تثبيت المتممة : يفيد في كشف العدوى المزمنة عند الحيوان. ه-اختبار كومبس: يستخدم لتشخيص الطور المزمن للبروسيلة عند الإنسان وهو يكشف عن الغلوبولين المناعيIgG. و-اختبار الاليزا: التحصين أنواع اللقاحات المستخدمة: 1-لقاح الذرية19المضعف:وهو لقاح مضعف ومحضر من عترات ملساء من البروسيلة المجهضةويستخدم لتحصين العجول بعمر3-6 أشهر بجرعة واحدة تحت الجلد ويعطي مناعة تستمر الى الحمل الخامس على الأقل. 2-لقاح 45/20: لقاح محضر من عترة خشنة من البروسيلة المجهضة تمنع به العجول بعمر 9أشهر أو أكبر ويفضل اعطاء جرعتين بفاصل زمني (6-12)أسبوع . 3-لقاح الذرية ريف1:وهي ذرية حية من البروسيلة المالطية قليلة الفوعة وتمنع به الحملان والجدايابعمر (4-6)أشهر وتعطي مناعة تستمر 4-5سنوات في الماعز وتستمر لغاية الحمل الثالث على الأقل عند الأغنام ويمكن تلقيح الكباش فيه. 4-لقاحH38المعطل:يحضر من ذرية البروسيلة المالطية الضارية المقتولة ويكسب الأغنام والماعز مناعة قوية لكنه يسبب تفاعلات ايجابية كاذبة من التشخيص المصلي. داء البروسيلة عند الأغنام والماعز. وهو مرض جرثومي معد مزمن يصيب الأغنام والماعز وغالبا يسير بدون أعراض ويسنن الاجهاض وأحيانا احتباس مشيمة . المسبب:البروسيلة المالطية وكذلك البروسيلة الغنمية الاأنه أحيانا يظهر أن المرض تسببه البروسيلة المجهضة. الأعراض: -يلاحظ حدوث الاجهاض في النصف الثاني من الحمل وأحيانا يلاحظ ولادات ميتة أو ولادات مبكرة تؤدي الى التهاب الرحم. -التهاب وتوذم بالمشيمة وتنكرز في الفلقات. -التهابات تحت سريرية في الضرع. -عند الكباش يمكن ملاحظة التهاب البربخ الذي يؤدي الى الضعف وانعدام القدرة على الاخصاب . داء البروسيلة عند الخيول: وهو مرض مزمن يصيب الخيول ويظهر بشكل ناسور بطبقات الجلد وبداية النخاع الشوكي مع اصابة الأوتار الرقبية القفوية والتهاب قيحي فيها وتوضع السوائل في محفظة المفصل المصاب وكذلك يلاحظ عرج شديد. الأعراض : -ناسور قيحي في منطقة الحارك مع ظهور عدة خراجات -التهاب في المحافظ الزلالية والأوتار العضلية الرقبية القفوية والمفاصل. -يلاحظ عرج على الحيوان مع عدم التحميل على القائمة المصابة. -كما يلاحظ الاجهاض عند الأفراس قبل الولادة ب(1-2)شهر.